ВВЕДЕНИЕ

В настоящее время отсутствуют препараты для химиотерапии и химиопрофилактики клещевого энцефалита (КЭ) - вирусного заболевания, широко распространенного на территории России, особенно в Сибирском регионе. Вместе с тем в результате изуче­ния ряда производных пиразолона, синтезированных в Томском политехническом университете [10], установлено, что они, помимо противовоспалительного и обезболивающего действия, существенно повышают функциональную активность клеток культуры фибробластов эмбриона человека (ФЭЧ), сокращая длительность всех параметров митотического цикла. Не обладая прямым  вирулицидным действием в клеточных культурах (ФЭЧ, Нер-2, L-41), они ингибируют репродукцию ряда РНК- и ДНК-содержащих вирусов. Этот эффект наблюдается после предварительной обработки клеток производными пиразолона и достигает максимума при экспозиции в течение 24 ч до инфицирования вирусом [9, 10, 12]. Антивирусная активность в наибольшей степени проявляется в отношении неполиомиелитных вирусов Коксаки (А13, А18, А21, В1, В4, В6) и ECHO 11, вируса везикулярного стоматита, гриппа и парагриппа. Введение атомов галогена, особенно йода, в ароматический радикал соединений усиливает их противовирусное действие [5]. Наиболее перспективным оказалось известное соединение 4-йодантипирин (1-фенил-2,3-диметил-4-йодпиразолон) [13]. Этот препарат  наименее цитотоксичен. В максималь­но переносимых дозах (МПД), которые составляют для культур клеток ФЭЧ и Vero 1000 мг/мл, а для L-41 -500 мг/мл йодантипирин не вызывал образования гра­нуляций, вакуолизации, изменения формы и размера клеток, не влиял на интенсивность синтеза ДНК, что свидетельствует об отсутствии "скрытой" токсичности соединения [4].

Цель работы — изучение эффективности йодантипирина при экспериментальном КЭ в сравнении с известным противовирусным средством тилороном (2,7-бис-2[диэтиламинотоксин]-9-флуоренон), оказы­вающим профилактический защитный эффект в отноше­нии вируса КЭ (ВКЭ) в экспериментах на животных [2].

МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Противовирусную активность йодантипирина на модели КЭ оценивали по методикам [1,3,6, 7]. Эксперименты проводили на 970 нелинейных мышах массой 10-12 г. Животных инфицировали однократно под­кожно ВКЭ, штамм Абсеттаров (титр 6,6 lg ЛД₅₀/0,2мл) в дозах 10-1000 ЛД₅₀ Эффективность йодантипирина испытывали при профилактическом и лечебном введении препарата внутрь или внутрибрюшинно. Лечебная схема: мышам, инфицированным 10 и 100 ЛД50 ВКЭ, вводили йодантипирин через час после заражения и затем ежедневно однократно в течение последующих 10 или 20 (при 100 ЛД₅₀) дней. Профилактическая схема: мышам, инфицированным 10 ЛД₅₀ ВКЭ, препарат вводили за 24 и 1 ч до заражения; при инфицировании животных 100 или 1000 ЛД₅₀— в течение 5 дней до заражения. Все серии экспериментов (неинфицированные мыши, получившие йодантипирин; инфицированные ВКЭ мыши без введения препарата; интактные животные) соответствующе контролировали. Каждая группа включала 15 мышей. Срок наблюдения 21 сут. Результаты оценивали по следующим показателям: выживаемость мышей (в %), защита животных (разница выживаемости в процентах между опытной и контрольной группами), средняя продолжительность жизни мышей (в сут), величина химиотерапевтического индекса (ХТИ), вычисляемая как отношение МПД к эффективной дозе (ЭД₅₀) [3].

РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Йодантипирин при введении внутрибрюшинно в дозе 50 мг/кг по лечебной схеме мышам, инфицированным 10 ЛД₅₀ ВКЭ, обеспечивал выживаемость 53,4% животных при средней продолжительности жизни 13 сут. Несколько более выраженный эффект получен при введении препарата в той же дозе внутрь - защита 60% мышей при средней продолжительности жизни 15,5 сут (таблица). При уменьшении дозы йодантипирина снижались оба показателя, характеризующие результативность лечения. ЭД₅₀ йодантипирина при лечебном введении составила 32,5 мг/кг, МПД - 500 мг/кг, ХТИ - 15.

Зависимость доза - эффект наблюдалась и при введении йодантийирина по профилактической схеме. Так, максимальная защита животных (47%) отмечена при введении йодадтипирина в дозе 50мг/кг как внутрь, так и внутрибрюшинной (см. таблицу). Аналогичный результат (43,7%) получен при введении внутрь тилорона в дозе 100 мг/кг, однако продолжительность жизни мышей, получавших йодантипирин - 14 сут, тилорон - 10,8 сут. Кроме того, тилорон является токсичным соединением и не проявляет лечебного действия при экспериментальном КЭ [2]. В контрольных группах наступала 100% гибель инфицированных ВКЭ мышей при средней продолжительности жизни 9,8 сут [11].

Лечебная и профилактическая эффективность йодантипирина сохранилась и в экспериментах, проведенных на мышах, инфицированных 100 и 1000 ЛД₅₀ ВКЭ. В частности, при лечении йодантипирином (введение внутрь) мышей, инфицированных 100 ЛД₅₀ ВКЭ, защитный эффект составил 38%, а при профилактическом введении 32% (р < 0,05).

Примечание. Каждый показатель - среднее из 15 наблюдений. 1 - выживаемость,%; 2 - средняя продолжительность жизни, дни.

Значительная эффективность йодантипирина при экспериментальном КЭ, очевидно, обусловлена соче­танием его противовирусной, ммуностимулирующей и интерфероногенной активностью. Препарат индуцирует выработку кислотолабильного (3-интерферона "поздне­го" типа [5]. Вместе с тем, лейкоциты — один из ос­новных продуцентов интерферона не только фагоцити­руют, но и накапливают ВКЭ [8]. Кроме того, йодантипирин, как и другие производные пиразолона, снижает проницаемость мембран, тормозя проникно­вение вируса в клетку и его репродукцию [14]. Разоб­щая окислительное фосфорилирование, препарат тор­мозит энергообеспечение репродукции вируса [10].

Клинические испытания йодантипирина выявили наибольшую эффективность препарата при лечении больных лихорадочной формой КЭ. На фоне его при­менения происходит более быстрое, по сравнению с иммуноглобулином против ВКЭ, исчезновение мозго­вых и общеинфекционных симптомов. При менингеальной форме эффект обоих препаратов равноценен. Показано иммуностимулирующее действие йоданти­пирина: у больных нормализуются показатели клеточ­ного и гуморального звена иммунитета, происходит активация естественных и антителозависимых килле­ров. Постинфекционный астенический синдром на­блюдался при обследовании перенесших клещевой эн­цефалит, независимо от формы заболевания, у 30% больных, леченных йодантипирином, и у 46% пациен­тов, получавших иммуноглобулин. Побочных эффек­тов при использовании йодантипирина не выявлено.

Судя по результатам эпидемиологических исследо­ваний, проведенных Томским областным центром санэпиднадзора, йодантипирин обладает более выражен­ным профилактическим действием по сравнению с иммуноглобулном. Среди лиц, зараженных ВКЭ, коли­чество заболевших составило: при проведении профи­лактики йодантипирином - 0,43%, иммуноглобулином - 1,79%. Кроме того, йодантипирин способствует более быстрому исчезновению антигена вируса КЭ из организма инфицированных лиц.

Йодантипирин и его лекарственная форма (таблетки по 100 мг) разрешены Минздравом РФ к медицинскому применению в качестве противовирусного пре­парата для лечения и профилактики КЭ.

ВЫВОДЫ

1. Йодантипирин в оптимальной дозе 50мг/кг внутрь, назначаемый мышам, инфицированным 10 ЛД₅о вирусом клещевого энцефалита, в течение 11 сут ежедневно, сохраняет жизнь 60% животных при сред­ней продолжительности жизни 15,5 сут.

2. Профилактическое двукратное введение препа­рата защищает от гибели 47% мышей при средней про­должительности жизни 14 сут (в контрольных группах гибель 100% мышей в течение 9,8 сут).

3. Клинические и эпидемиологические испытания подтвердили значительную эффективность йодантипирина в качестве средства лечения и профилактики кле­щевого энцефалита.