Для изучения механизма защитного действия иодантипирина методом случайного выбора формировали 2 репре­зентативные группы детей, которым с разрешения родите­лей применяли препарат и исследовали иммунный статус. Основная группа детей (57 человек) получали иодантипирин, контрольная (30 человек) препарат не получали.

Опытной группе препарат назначали по двум схемам в зависимости от возраста детей. 1 схема: дети 3-5 лет(1 груп­па) - первый день 0,1г (1 таблетка), далее по 0,05г (1/2 таб­летки) через 3 дня весь эпидсезон. 2 схема: дети 6-9 лет (2 группа) - первый день 0,15г(1,5 таблетки), далее по 0,1г(1 таблетка) 2 раза в неделю весь эпидсезон.

Исследования проводились у части детей через 1,5-2не-дели после отмены препарата (группа 1А и 2А), у остальных детей через 3-4 недели (группа 1Б и 2Б).

Максимальная кратность приема препарата -17-18 раз.

Оценка иммунного статуса детей включала следующие методы:

Оценка субпопуляционного состава лимфоцитов перифе­рической крови проводилась на клетках, выделенных на гра­диенте плотности фиколл-верографин (Boyew, 1968), мето­дом непрямой иммунофлюоресценции. В работе применяли моноклональные антитела к дифференцированным антиге­нам лимфоцитов производства фирмы «ДиагноТех» (Моск­ва, ОНЦ). В качестве вторых антител служили кроличьи ан­титела против иммуноглобулинов белой мыши, меченные FITC, производства НИИ эпидемиологиии микробиологии им.Гамалеи (Москва). 2. Оценка фагоцитарной функции нейтрофилов периферической крови проводилась в НСТ-тесте в спонтанном и стимулированном вариантах. В качестве сти­мулятора служил опсонизированный зимозан (Маянский А.Н., Маянский Д.Н., 1983). 3. Определение уровня иммуноглобулинов сыворотки крови проводилось методом радиальной иммунодиффузии (Mancini G., 19 70). 4. Определение циркулирующих иммyнныx кoмплeкcoв (ЦИK)-мeтoдoм DigconM. (1977). 5. Количественное определение альфа-интерферона в сыворотке проводилось с использованием твердофазного иммуноферментного метода с применением пероксидазы хрена в качестве инди­каторного фермента. Использовались наборы реагентов РгоСоn IF рlus производства ТОО «Протеиновый контур» (г. Санкт-Петербург).

Результаты исследований.

В исследуемых группах детей не обнаружено достовер­ных различий по уровню лейкоцитов и лимфоцитов перифе­рической крови. Несмотря на это в субпопуляционном соста­ве периферической крови обследованных детей обнаруже­ны существенные особенности. Так, показано, что у детей из различных возрастных групп (3-5 и 6-9 лет) в отдаленные сроки после применения препарата наблюдаются статисти­чески значимые различия в относительном содержании зре­лых CD3+ лимфоцитов (42,5±1,16% в младшей группе про­тив 57,814,64% в старшей, Р<0,05). Во второй группе детей в эти же сроки выявлено и более высокое абсолютное содер­жание зрелых CD3+ лимфоцитов (1707,71208,4 против 1089,6193,0 для детей младшей возрастной группы, Р<0,05). Необходимо отметить, что в группе детей младшего возрас­та наблюдается снижение уровня зрелых CD3+лимфоцитов по сравнению с контролем во все сроки наблюдения (46,2+2,31% и 42,511,16% против 51,412,26% в контроле, Р<0,05).

Содержание лимфоцитов-хелперов (CD4+) достоверно не различалось в изучаемых группах, как в абсолютном, так и в относительном выражении. Абсолютное содержание CD8+ - лимфоцитов (супрессоры/цитотоксические) досто­верно выше у детей старшей возрастной группы в отдален­ные сроки после лечения по сравнению с контролем (1018,0+96,9 против 712,2+54,1 в контроле, Р<0,05). Так как ни количество хелперов, ни количество супрессоров досто­верно не меняется в исследуемых группах, не выявлено раз­личий и в величине иммунорегуляторного коэффициента хелперы/супрессоры, который колеблется в очень неболь­ших пределах от 1,09 до 1,28.

Наиболее интересные различия субпопуляционного со­става лимфоцитов периферической крови обследованных детей получены по уровню естественных киллеров (ЕК). В младшей возрастной группе через 2 недели после приема препарата уровень ЕК (CD16+) понижается по сравнению с контролем, а затем повышается в отдаленные сроки до вели­чин, превышающих контрольные (23,0+1,99%в контроле про­тив 17,811,54% через 2 неделии27,113,10%вотдаленные сро­ки, Р<0,05). Та же тенденция наблюдается и во второй возра­стной группе: снижение относительного количества ЕК в ран­ние сроки после приема препарата и повышение их уровня в отдаленные сроки.

Достоверные различия наблюдаются по уровню В-лим­фоцитов (CD72+) между разновозрастными группами: у де­тей старшего возраста в контрольной группе и через 2 неде­ли после окончания приема препарата уровень CD72+ лим­фоцитов достоверно ниже, чем у младших детей, как в абсо­лютном, так и в относительном выражении.

Особенности субпопуляционного состава лимфоцитов до­полняются особенностями функционирования других иммунокомпетентных клеток, в частности, нейтрофильных фаго­цитов. В обеих возрастных группах детей наблюдается сни­жение спонтанного фагоцитоза через 1,5-2 недели после приема препарата и его достоверное повышение в более отдаленные сроки, при этом интенсивность спонтанной НСТ-реакции имеет ту же закономерность: снижение к первой опытной точке и достоверное ее повышение через З – 4 недели. Фагоцитарный резерв (в%) и интенсивность реакции НСТ в обеих возрастных группах имеет одинаковые закономерности изменения: достоверное снижение по сравнению с контролем через 1,5-2 недели и достоверное по­вышение в отдаленные сроки наблюдений.

Совпадение направления изменений содержания натуральных киллерови реакций нейтрофильного фагоцитоза может свидетельствовать в пользу глубокой заинтересованности клеточных механизмов иммунитета в ответ на применяемый препарат. При этом следует отметить, что наблюдаемые в отдаленные сроки после приема препарата повышение содержания ЕК в крови и увеличение фагоцитарного резерва нейтрофилов, что указывает на их высокую способность к завершенному фагоцитозу, можно рассматриватькакгфизна1Шповьш1енияестественнойрезистен-тности организма.

В плане характеристики гуморального звена системы иммунитета необходимо отметить повышение уровня IgG и циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) у детей старшей возрастной группы в отдаленные сроки после приема препарата. Аналогичное повышение ypoвня lgG в отдаленные сроки после приема препарата замечено и у детей младшей возрастной группы. У этих детей (3-5 лет) наблюдается также снижение уровня IgA через две недели после отмены препарата с дальнейшим его достовер­ным повышением. В группе детей старшего возраста уровень иммуноглобулинов класса А достоверно не менялся. В общем, динамика изменения уровня иммуноглобулинов соответствует таковой для фушшиональной активности нейтрофилов и процентного содержания ЕК. Достоверных различий по уровню имму­ноглобулина Ми в сравниваемых группах не обнаружено.

В контрольных группах детей выявлено низкое содержание сывороточногоальфа-интерферона-8 пкг/мл и 13 пкг/мл в 1-йи 2-й соответственно, что не выходит за рамки физиологической нормы (0-50пкг/мл).

В ранневозрастной группе (3-5 лет), получавшей препа­рат, отмечено существенное повышение титров ИФН - до 126 пкг/мл в среднем через 2 недели после прекращайся приема. Такое высокое среднее значение определяется тем, что у 33% детей отмечено возрастание ИФН до 200 пкг/мл и выше (у 4-х человек более 500 пкг/мл). У остальных детей ИФН в крови практически не определялся. В группе детей 6 – 9 лет, обсле­дованных через 2 недели после получения препарата, также увеличено среднее содержание ИФН до 90 пкг/мл, однако это произошло за счет высоких значений (более 500 пкг/мл) у 2-х человек на фоне практического отсутствия определяемых титров у других обследованных.

Через месяц после прекращения приема препарата у де­тей раннего возраста содержание ИФН в крови было на уров­не нормы, а у старшей группы - повышено до 80 пкг7мл, дос­товерно превышая контрольный уровень (группа 2). Несмот­ря на существенные различия между группами детей ран­него возраста, обследованных через 2 и через 4 недели после приема препарата. Большой разброс данных не позволяет сделать этого при сравнении других групп.

В период приема препарата часть детей в опытных груп­пах перенесли ряд заболеваний. Так, в младшей группе де­тей, обследованных через 1,5-2 недели после получения пре­парата (21 человек) грипп перенесли 4, ОРВИ - один чело­век, был случай респираторного аллергоза и один случай отита. Анализ иммунологических показателей в этой группе после исключения данных переболевших детей не выявил достоверных изменений средних величин исследуемых параметров.

В группе людей, обследованных через месяц после курса лечения, из 8 человек трое детей в период приема препарата переболели ОРВИ. Удаление данных этих детей из общей выборки также не изменило средних показателей иммуно­логических параметров.

В группе 2А (старшие дети через 2 недели после отмены препарата) из 11 человек двое переболели гриппом (один с пневмонией), двое перенесли ОРЗ и один ребенок болел оти­том. При отсеве данных этих детей существенно изменился лишь средний уровень циркулирующих иммунных комплек­сов. Среди неболевших детей он стал значительно ниже (во всей группе 50,9±10,26 усл.ед. против 36,6+6,10 усл.ед. у не­болевших детей).

В группе 2Б (старшие дети в отдаленные сроки после от­мены препарата) из 10 человек один ребенок перенес грипп. Именно у этого ребенка интенсивность реакции (ИР, усл.ед.) была самой высокой в группе, поэтому удаление значения ИР НСТ этого ребенка привело к небольшому понижению сред­него значения показателя в целом в группе.

Таким образом, среди детей младшего возраста заболе­вания, перенесенные на фоне приема препарата, не оказали существенно влияния на показатели иммунного статуса. Иммунологические параметры детей старшей группы ока­зались более лабильны и частично менялись с учетом пере­несенных заболеваний. Полученные данные могут свидетель­ствовать либо о незрелости системы иммунитета у младших детей, либо о более высокой чувствительности их иммунных механизмов к применяемому препарату по сравнению с бо­лее старшими детьми.

Особо хотелось бы остановиться на характеристике де­тей, у которых выявлены высокие титры сывороточного аль­фаинтерферона после приема препарата (7 чел. из младшей группы 2 недели после окончания курса, 2 чел. из младшей группы и 1 чел. из старшей группы, обследование которых проводилось через 3-4 недели по окончании лечения). Лишь у одного ребенка отмечаются частые респираторные инфек­ции (4 раза в год), хотя в период приема препарата заболева­ния не было. У одного с рождения наблюдается респиратор­ный аллергоз, обострение которого было отмечено и в период приема препарата. Половина из этих детей (5 человек) оста­вались здоровыми в течение всего профилактического пери­ода приема препарата, 3 переболели ОРВИ с последующим возобновлением приема препарата в течение срока не менее 3-х недель. 2 детей перенесли грипп и не продолжали после этого прием лекарства. На основании этих данных можно по­лагать, что по меньшей мере у 50% повышение альфаинтер­ферона в сыворотке крови можно связать с влиянием йодантипирина.

В целом, анализ полученных результатов позволяет го­ворить о влиянии профилактического приема препарата йодантипирина на систему иммунитета, что проявляется в по­вышении фукциональной активности нейтрофилов, а также увеличении содержании естественных киллеров и уровня иммуноглобулинов в крови через 3-4 недели после полного курса приема препарата. Полученные данные свидетель­ствуют также об интерфероногенных свойствах препарата, однако требуются дополнительные исследования с тем, что­бы разработать оптимальные дозы и схемы введения йодантипирина для поддержания высоких титров интерферона в орга­низме.

Полученные данные в сопоставлении результатами клини­ческого обследования дают определенные основания для заклю­чения о том, что для профилактики ОРВИ и гриппа прием йодантипирина необходимо проводить не позднее, чем за 3 недели до начала эпид. сезона.